ΤΙΤΛΟΣ: Διερεύνηση της ενδοκυττάριας εντόπισης της ογκοκατασταλτικής πρωτεΐνης Maspin, της συσχέτισής της με την έκφραση του αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) και των σχέσεων αυτών με το HER2 και άλλες κλινικοπαθολογοανατομικές παραμέτρους στο διηθητικό πορογενές καρκίνωμα του μαστού.

 

 

Πανεπιστή-μιο	Νοσοκομείο / Κλινική / Εργαστήριο	Επιβλέποντες	Βαθμός	Έτος λήψης
Εθνικό και Καποδιστρι-ακό Πανεπιστή-μιο Αθηνών (ΕΚΠΑ)	1η Προπαιδευτική Χειρουργική Κλινική –Ιπποκράτειο Νοσοκομείο  1ο Εργαστήριο Παθολογικής Ανατομικής	Dr ΓΕΩΡΓΙΟΣ Κ. ΖΩΓΡΑΦΟΣ        Καθηγητής Χειρουργικής        Dr ΝΙΚΟΛΑΟΣ ΚΑΒΑΝΤΖΑΣ   Καθηγητής Παθολογικής Ανατομικής	Άριστα	2013

 

Συνοπτική περιγραφή της διαδικασίας:

 

 

Το δείγμα μας απετέλεσαν 48 πρωτοπαθή πορογενή διηθητικά καρκινώματα του μαστού. Η χρώση της maspin εξετάσθηκε τόσο ξεχωριστά μεταξύ πυρηνικού και κυτταροπλασματικού κλάσματος όσο και συνολικά και ερευνήθηκαν οι συσχετίσεις των τριών κλασμάτων της maspin μεταξύ τους (πυρηνικής – κυτταροπλασματικής – ολικής) αλλά και οι συσχετίσεις τους με την έκφραση του VEGF, του CD34 (No/mm2) και των ποικίλων κλινικοπαθολογο-ανατομικών παραμέτρων. Η χρώσεις της maspin και του VEGF μετρήθηκαν και βαθμολο-γήθηκαν από δύο παθολογοανατόμους μέσω του απλού μικροσκοπίου (LM).

 

Για την εκτίμηση της χρώσης της maspin, χρησιμοποιήθηκε ένα  σύστημα το οποίο είχε, επίσης, χρησιμοποιηθεί παλαιότερα. Για τον κάθε όγκο ελήφθη ένα score, για τον υπολογισμό του οποίου η ένταση της χρώσης (καμία ένταση = 0, χαμηλή ένταση = 1, μέτρια ένταση = 2 και ισχυρή ένταση =3) και το ποσοστό των θετικών κυττάρων (0% = 0, <10% = 1, 10-50% = 2, 51-80% = 3 και >80% = 4) πολλαπλασιάστηκαν μεταξύ τους. Με τον πολλαπλασιασμό των δύο αυτών παραγόντων, ένα score ανοσοενεργότητας (ΙmmunoReactive Score – IRS ή IRS_{PATHOLOGIST SCORE} ) ελήφθη, το οποίο κυμαινόταν από 0 έως 12. Υπολογίστηκε ξεχωριστά ένα IRS_{PATHOLOGIST SCORE}  για το πυρηνικό κλάσμα της maspin και ένα για το κυτταροπλασματικό.

 

To Computerized Image Analysis (CIA) σύστημα [Image-Pro Plus 6.0 – Media Cybernetics, INC, Silver Spring, Maryland, USA] είχε χρησιμοποιηθεί και αλλού και στη μελέτη μας χρησιμοποιήθηκε για την εκτίμηση των κάτωθι:

• της ολικής maspin σε κάθε κύτταρο, ανεξάρτητα από την κυτταροπλασματική ή πυρηνική της εντόπιση/κατανομή,

• του VEGF και

• του αριθμού των σημασμένων μέσω του CD34 αγγείων ανά τετραγωνική μονάδα επιφανείας (No / mm2).

Σε κάθε εικόνα οι παράμετροι οι οποίες μετρήθηκαν από το CIA system ήταν: η ένταση της χρώσης τόσο της maspin όσο και VEGF στα καρκινικά κύτταρα και το ποσοστό της θετικής έκτασης σε σχέση με το συνολικό ιστό της εικόνας. Τα επίπεδα έντασης της χρώσης της maspin και του VEGF μετρήθηκαν με τη χρήση arbitrary units σε μία γραμμική συνεχή κλίμακα από το 0 (μέγιστη ένταση) έως το 255 (μη ανιχνεύσιμη ένταση), για κάθε RGB (Red – Green – Blue) κανάλι (Color Segmentation). Υπολογίζοντας τις μέσες τιμές από τα δεδομένα 7-10 εικόνων για κάθε περιστατικό, οι οποίες υπέστησαν επεξεργασία από το Image Analysis program (CIA), λάβαμε στο τέλος μία μέση ένταση χρώσης και ένα μέσο ποσοστό θετικής έκτασης (% περιοχή).

To IRS _{IMAGE ANALYSIS SCORE} (IRS _I.A.SCORE) για τη maspin και το VEGF υπολογίστηκε βάσει της παρακάτω φόρμουλας:  IRS _I.A.SCORE = (255 – a) x b%,  όπου:  a = η μετρημένη ένταση της χρώσης της maspin ή του VEGF (διακύμανση μεταξύ 0 – 255) και b = το ποσοστό των θετικών κυττάρων.

 

Μετά τις μετρήσεις της περιγραφικής στατιστικής, εκτιμήθηκαν οι σχέσεις μεταξύ των: VEGF (IRS_I.A.SCORE), ολική maspin (IRS_I.A.SCORE), πυρηνική maspin (IRS_{PATHOLOGIST SCORE}), κυτταροπλασματική maspin (IRS_{PATHOLOGIST SCORE}), CD34 (No/mm²) και των ποικίλων κλινικοπαθολογοανατομικών παραμέτρων (ηλικία, grade, μέγεθος του όγκου, status των μασχαλιαίων λεμφαδένων, μεταστάσεις, stage, οιστρογονικοί υποδοχείς (ER), προγεστερονικοί υποδοχείς (PR), το status του HER2, θετικότητα των ki-67 και p53 και μοριακή ταξινόμηση της νόσου). Τα αποτελέσματα έτυχαν στατιστικής επεξεργασίας με: (α’) Μονομεταβλητές μη-παραμετρικές στατιστικές μεθόδους και (β’) πολυμεταβλητή ordinal logistic regression.

 

 επιστροφή στην αρχική σελίδα